樣品處理

1. 組織：按照質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g 離心 5min，取全部上清于 4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于 1mL 試劑一。

2. 細胞：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后于4℃，10000g 離心5min，取全部上清于4℃、100000g 離心30min，棄上清，取沉淀溶于1mL試劑一。

3. 血清：直接測定。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據(jù)!

試劑組成和配制

提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體×5 瓶，-20℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加入4.5mL試劑二充分混勻。(3天使用完)

優(yōu)點如下：

1、快速簡便：操作時間短，48-50T，可測40例樣本左右，96-100T,可測80例樣本左右；

2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標儀操作僅需5l即可檢測，部分試劑盒取樣多少請；

3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個月有效；

4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；

5、回收試驗： X =99%；

6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強；

7、測試面廣：可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細胞以及細胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測植物。

測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

COLLAGEN II蛋白免疫共沉淀分析試劑盒  5次

COLLAGEN II蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒  25次

脘蛋白基因變異分析試劑盒  20次

活體細胞脘蛋白去糖基化試劑盒  20次

體外脘蛋白去糖基化試劑盒  20次

體外脘蛋白轉化（in vitro conversion）分析試劑盒  50次

脘蛋白糖基化定性分析試劑盒  5次

脘蛋白糖基化分型（glycoform）試劑盒  5次

細胞脘蛋白（PRION）蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒  10/20次

谷氨酸(Glu)含量試劑盒（酶法）說明書C蛋白免疫共沉淀分析試劑盒  5次

C蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒  25次

性染色體分離（Ericsson法）試劑盒  20次

性染色體分離（percoll法）試劑盒  20次

性染色體分離（流式儀法）試劑盒  20次

細胞氧化應激活性氧（ROS）細胞流式儀檢測試劑盒  20次

細胞氧化應激活性氧超氧陰離子細胞流式儀檢測試劑盒  20次

細胞BWW培養(yǎng)液  100/500毫升

細胞凍存液  10次

細胞等密度離心法高純分離試劑盒  10次